pEGFP-N1载体主要用于真核细胞表达系统,尤其适合以下类型的宿主细胞: 1. **哺乳动物细胞**(如293T细胞):这是最常见的应用对象,可在37℃、有氧及5% CO₂条件下培养,无需诱导即可实现目的基因的瞬时表达。该载体携带的绿色荧光蛋白有助于直观监测转染效率和蛋白定位。 2. **其他贴壁生长型哺乳类细胞系**:例如Siha细胞等,可通过常规转染方法导入目的基因并进行功能研究。其兼容性强的特点使其能适配多种实验需求,包括增殖与凋亡相关分析。 此外,该载体虽能在原核细胞中复制并支持卡那霉素筛选,但主要设计用途仍为真核表达。其优化后的红移变体GFP在哺乳动物细胞中可产生更明亮的荧光信号,最大激发/发射波长分别为488nm和507nm,进一步提升了检测灵敏度。 需要注意的是,若需表达荧光融合蛋白,需确保目的基因与EGFP读码框一致,并可能需要调整终止子结构以满足实验要求。